耗材專(zhuān)區 EZsepTM MAX固相萃取柱檢測動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量

前言：

碘醚柳胺是鹵化水楊酰苯胺類(lèi)殺吸蟲(chóng)藥，可以抑制蟲(chóng)體線(xiàn)粒體的磷酸化過(guò)程，從而阻止蟲(chóng)體內三磷酸腺甙Chemicalbook（ATP）的合成，導致蟲(chóng)體能量代謝的活力迅速減弱而死亡。它與血液蛋白有很強的親和力，所以藥效在血液中有較長(cháng)的持續時(shí)間，造成藥物在動(dòng)物體內富集，而人類(lèi)食用這些肉類(lèi)會(huì )使獸藥殘留進(jìn)入人體，從而影響身體健康。

本文參照《動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（征求意見(jiàn)稿）》，利用EZsep^TMMAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）進(jìn)行凈化，再用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測，建立了一種對動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量的分析方法。

關(guān)鍵詞：

動(dòng)物性食品，碘醚柳胺，固相萃取

1， 實(shí)驗過(guò)程

1.1 儀器與試劑  

MPREP-SPE08手動(dòng)固相萃取裝置，貨號：PZ0008，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

E.T.氮吹濃縮儀，貨號：C020017，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

4500質(zhì)譜系統，SCIEX公司；

EZsep^TMMAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802），北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

冷凍離心機，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng)  ；  

甲醇（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

乙腈（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

甲酸，氨水，三乙胺等化學(xué)品均為分析純或以上，購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司。

1.1 工作液配制

碘醚柳胺標準物質(zhì)：100mg/瓶，購自壇墨質(zhì)檢標準物質(zhì)中心 。

碘醚柳胺標準儲備液：取碘醚柳胺標準品適量(相當于有效成分約10mg)，精密稱(chēng)定，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為1000μg/mL的碘醚柳胺標準儲備液。

碘醚柳胺標準中間液:移取碘醚柳胺標準儲備液0.1mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為10μg/mL的碘醚柳胺標準中間液。

碘醚柳胺標準使用液:碘醚柳胺標準中間液0.1mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為0.1μg/mL的碘醚柳胺標準使用液。

分別移取0.1μg/mL的碘醚柳胺標準使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0mL分別置于10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度，標準濃度為0.2 μg/L、1μg/L、5μg/L、20μg/L、50μg/L。

1.3 實(shí)驗部分

1.3.1 樣品制備

取羊腰試樣2g，置于50 mL聚丙烯離心管中，加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液均質(zhì)5min,超聲提取10 min,8000 r/min離心5 min,收集上清液至另一50 mL離心管中殘渣中加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液，重復提取一次，合并兩次上清液，混勻，取提取液5.0 mL備用待凈化。

1.3.2 固相萃取凈化

EZsep^TMMAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）用5mL乙腈進(jìn)行活化，取1.3.1待凈化液上樣，上樣結束后用5mL乙腈淋洗萃取柱，再用5mL 5%甲酸乙腈洗脫萃取柱，收集洗脫液，以E.T.氮吹濃縮儀，45℃氮氣濃縮至近干，加2.0 mL甲醇，渦旋混勻過(guò)微孔濾膜后供LC-MS/MS測定。

1.3.3 LC-MS/MS儀器條件

色譜柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；

檢測方式：多反應監測（MRM）；

流動(dòng)相：A:0.1%氨水水溶液 B: 甲醇；

流速：0.3mL/min；

進(jìn)樣量：5μL。

表1流動(dòng)相梯度洗脫表

1， 實(shí)驗結果

圖1 標液色譜圖

圖2碘醚柳胺標準曲線(xiàn)圖

1， 結論

本次實(shí)驗展示了使用EZsep^TMMAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）對動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量進(jìn)行凈化，通過(guò)高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行測定，其加標回收率在85.0%~93.3%之間，RSD在3.6%，能夠滿(mǎn)足標準要求。說(shuō)明EZsep^TMMAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號：PZ12802）能很好的完成方法中的凈化工作，并且結果穩定、可靠。

2， 參考文獻

1. 《動(dòng)物性食品中碘醚柳胺殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（征求意見(jiàn)稿）》

表 1   加標回收率結果